Diagnosticul de laborator al DIABETULUI MELLITUS Partea 4
Progresul tehnologiei medicale a condus la crearea unor sisteme portabile de monitorizare a glucozei (GCS, glucometre), care au fost folosite nu numai de diabetici pentru auto-monitorizarea la domiciliu a nivelului de glucoză, ci și în cabinetele medicilor generaliști, clinici, endocrinologie. secţiile instituţiilor medicale. În acest sens, s-a pus întrebarea despre adevărul și comparabilitatea datelor obținute cu ajutorul SCSG și a metodelor de laborator de referință pentru studierea glucozei, despre gama de sarcini pentru care poate fi implicat SCSG portabil.
Metoda de laborator de referință este hexokinaza (Glucoză - NK). Necesită reactivi, enzime și coenzime scumpe și poate fi efectuat într-un număr limitat de laboratoare, cum ar fi metoda glucozei dehidrogenazei (Glucoză - GDH). Cea mai comună și justificată din punct de vedere economic metodă din lume este metoda glucozo-oxidazei (Glucose - GOD) fiabilă din punct de vedere analitic.
Acest lucru este confirmat de datele obținute la determinarea concentrației de glucoză în aceleași probe de ser, materiale de control folosind metoda hexokinazei (reactivi ai corporației La Roche, analizor automat Cobas MIRA, La Roche) și metoda glucozei oxidazei (reactivi corporației La Roche). , precum și Vital Diagnostics ).
Există analizoare fotometrice speciale de laborator precum ESAT (România), Biosen (Germania) pentru determinarea glucozei prin metoda glucozooxidazei până la punctul final. Ele vă permit să lucrați atât cu ser, cât și cu sânge integral. Au apărut dispozitive care implementează principiul cinetic de înregistrare a vitezei reacției glucozooxidazei. Rezultatele determinării concentrației de glucoză obținute prin această metodă nu depind de prezența substanțelor interferente în probă.
Instrumente de laborator staționare,a căror funcționare se bazează pe principiul de măsurare electrochimic (amperometric): Stat Pro file (SUA), Exan G (Lituania), Eco Twenty (Germania), Super GL Ambulance (Germania), etc., au o membrană cu glucozooxidază imobilizată . Celula de măsurare a instrumentului este limitată de o membrană enzimatică pe o parte și de un electrod de platină pe cealaltă parte. Proba de sânge integral este diluată într-un tampon special și introdusă în celula de măsurare a debitului. În timpul reacției glucozooxidazei se formează peroxid de hidrogen, care difuzează prin membrană și se oxidează ușor prin acțiunea platinei, donând electroni. Curentul electric este proporțional cu numărul de molecule de peroxid de hidrogen formate ca urmare a conversiei aceluiași număr de molecule de glucoză, adică proporțional cu concentrația de glucoză din probă. Acesta din urmă este calculat folosind un convertor analog-digital.
Zonele de reactiv „uscate” ale benzilor de testare, concepute pentru funcționarea glucometrelor, conțin și glucozooxidază. Unele dintre ele au în plus peroxidază și implementează reacția glucozooxidază-peroxidază, în timpul căreia un produs colorat se acumulează în zona de reacție. Cantitatea de produs cromogen este proporțională cu concentrația de glucoză. Glucometrele în acest caz acționează ca fotometre reflectorizante portabile.
Când lucrați cu glucometre de prima generație, a fost necesar să îndepărtați o picătură de sânge din zona de reactiv după ceva timp pentru a nu interfera cu funcționarea fotometrului: Reflolux (Germania), Glucochrome (România), Accu-Chek Activ (Germania). Cele mai multe modele moderne oferă o muncă mai convenabilă care nu necesită această operațiune cu benzi de testare special concepute, care au un strat special care acționează ca un filtru care captează celulele sanguine, un burete-rezervor care colecteazăcantitatea necesară de lichid și o suprafață netedă care ajută la reflectarea luminii: One Touch (Basic, Profile, Ultra; SUA, Life Scan Corporation), Glucotrend (Germania, Roche), etc.
Rezultatul obținut folosind astfel de sisteme de testare depinde de puritatea, cantitatea și activitatea enzimelor, raportul dintre glucozooxidază/peroxidază, concentrația de reactivi, metoda de calibrare inițială, adică variază inevitabil în funcție de producător.
Odată cu această abordare, se dezvoltă și se îmbunătățește direcția creării benzilor de testare „electronice”, bazată pe utilizarea metodei electrochimice. Acestea sunt Smart Scan (Life Scan), Glucocard II (Arkray), Elite și Esprit (Bayer), AccuChek Advantage (Roche), Precision QID, XTRA (Medi Sense) etc.
O astfel de bandă de testare are o microcelulă care conține un complex de reactivi și electrozi de măsurare. Metoda amperometrică de măsurare a concentrației de glucoză este oarecum modificată. Oxidarea glucozei cu participarea glucozoxidazei este însoțită de reducerea ferocianurii de potasiu, care, la contactul cu electrodul, se oxidează, donând un electron. În domeniul de măsurare al dispozitivului, dependența curentului electric de concentrația de glucoză este liniară și se caracterizează printr-un factor de calibrare, care, la rândul său, depinde de designul celulei de măsurare, de concentrația de reactivi și de activitatea enzimatică.
Producătorii fac în mod constant îmbunătățiri tehnice pentru a reduce volumul probei și a reduce timpul de analiză de la 4 µl, 45 s (One Touch Basic, Accu-Chek Advantage) la 1 µl, 5 s (One Touch Ultra, Accu-Chek Active). Multe dispozitive necesită 2–3 μL și 15–30 s pentru aceasta: Sure Step, Fast Take (Life Scan), Glucocard II (Arkray), Elite, Esprit (Bayer), Sof Tact (Medisens). Simplifica tehnica de aplicare a sangelui pe banda. Primele modele au necesitat ca o picătură să fie aplicată exact în centrul zonei de reactiv, evitând atingerea benzii cu degetul. Analogii moderni permit atingerea chiar și a unei părți a benzii, deoarece datorită microcapilarelor încorporate, sângele intră rapid și uniform în zona de testare (Glucocard II, Glucotrend, Accu-Chek Complete, Elite, Esprit etc.). Au fost dezvoltate dispozitive combinate cu o lancetă, în care acul însuși extrage sânge și îl transferă pe o bandă de testare (At Last, Chek Mate Plus; SUA), precum și un glucometru combinat cu o seringă (În Duo, SUA). .
Unii producători urmează calea simplificării maxime a lucrului cu dispozitivul pentru utilizator, a reducerii dimensiunilor, a greutății acestuia (Glucocard II, Japonia) sau a reducerii prețului (Reli ON, SUA). Alții îmbunătățesc software-ul, permițându-vă să calculați medii pentru o zi, săptămână, lună, să construiți grafice, să conectați glucometrul, dacă este necesar, la un computer personal (Roche, Bayer etc.). Alții completează determinarea glucozei prin crearea de benzi de testare pentru cetone (pentru dispozitivul Precision XTRA), colesterol (pentru Accutrend GC).
Aparatul Sens Lab 1A (Germania), care vă permite să determinați glucoza, lactatul și etanolul, este echipat cu trei tipuri de biosenzori amperometrici cu enzime care pot fi spălate și reutilizate. Au apărut alte dispozitive de tip nou, de exemplu, Thera Sense Free Style and Tracker (SUA), care fac posibilă determinarea concentrației de glucoză în doar 0,3 µl de sânge, non-invaziv Gluco Watch Biographer (Cygnus). Inc., SUA), care este încă scump și necesită înlocuirea senzorului la fiecare 12 ore.
Dezvoltarea sistemelor portabile de monitorizare a glucozei este extrem de importantă. În același timp, dorința naturală a endocrinologilor și asistenților de laboratoreste de a obține informații despre comparabilitatea rezultatelor obținute folosind orice SKSG portabil (glucometru) și o metodă de laborator de referință mai familiară. În acest sens, oamenii de știință din diferite țări au efectuat studii, ale căror rezultate au diferit nu numai datorită utilizării diferitelor modele de glucometre, ci și a seturilor de reactivi, dispozitive de măsurare și tehnologie pentru metoda de referință a glucozei oxidazei. Se știe că valoarea glucozei din sângele total este de aproximativ 90% din nivelul acesteia din ser (plasmă). Prin urmare, rezultatele obținute în laboratorul de diagnostic clinic folosind metoda de referință în serul sanguin au trebuit să fie reduse preliminar de 1,12 ori și abia apoi comparate cu datele obținute cu ajutorul unui glucometru în sângele capilar al aceluiași pacient. (În prezent, Instrumentul de scanare inteligentă oferă un calcul similar.)
În ciuda faptului că acest factor a fost luat în considerare, abaterea datelor furnizate de SSG de la valoarea de laborator a variat între 2% și 30% și a existat o tendință constantă de obținere a concentrațiilor mai mici de glucoză pe benzile de testare. Pare mai logic să încercăm să comparăm rezultatele obținute cu ajutorul unui glucometru cu datele metodelor de referință de laborator care utilizează sânge integral (analizoare de glucoză pentru grupa de sânge integral Stat Profile, Yellow Springs Instruments (YSI, SUA), ESAT (Germania)).
Ca parte a Programului clinic european privind sistemele de monitorizare a glucozei din sânge, oameni de știință din Franța, Italia, Germania și Țările de Jos au efectuat studii care compară datele furnizate de One Touch GCS și metoda de laborator de referință pentru determinarea glucozei pe analizorul YSI. Ele sunt combinate în Compendiul clinic european. Date rezumative exprimateca o regresie liniară a rezultatelor, arată o corelație bună cu metoda de referință.
O corelare bună similară a rezultatelor este demonstrată de metoda hexokinazei de laborator de referință pentru determinarea glucozei (cu sânge integral) și Glucotrend SKSG din ultima versiune de la Roche-Behringer. Ambele dispozitive (One Touch și Glucotrend) prezintă o corelație cu metoda prin care a fost calibrat (glucozooxidază și, respectiv, hexokinaza), deși numerele absolute de glucoză din aceeași probă diferă.
 |
1. Diabet. Clinica, diagnostic, complicatii tardive, tratament: Ucheb.-metoda. indemnizatie. - M., Medpraktika. - M., 2005.
2. Dedov I. I. Diabet zaharat la copii și adolescenți, - M .: GEOTAR-Media, 2007.
3. Lyabakh N. N. Diabet zaharat: monitorizare, modelare, management. - Rostov n/D, 2004.
4. Edelman S V, Henry R. R. Diagnostic and management of type II diabet, 1998, PCI, capitolul 7. Oral agents.
5. Astakhov Yu. S., Blagosklonnaya Ya. V., Panov A. V. și colab. Complicații tardive ale diabetului zaharat de tip 2. - Sankt Petersburg, 1999.
6. Emanuel Yu. V., Karyagina I. Yu. Tehnologii de laborator pentru diagnosticarea și monitorizarea diabetului zaharat / / Clinic. laborator. diag. - 2002. - Nr. 5. - P. 25–32.
7. Kallner A. / / Scand. J.Clin. laborator. Investi. - 1998. - Vol.58, Nr. 228. - P.98–104.
8. Stahl M., Brandslund I., Iversen S., Filtenborg J. // Clin. Chim. - 1997. - Vol. 43, nr. 10. - P. 1926–31.
9. Charles M, Clark J Terapia orală în diabetul de tip 2: Proprietăți farmacologice și utilizare clinică a agenților disponibili în prezent. Spectrul diabetului, 1998, 11 (4), p. 211221.